1990年，杨玉梅参加亚洲小姐竞选，获得“最上镜小姐”、“完美体态小姐”及季军奖项，随后签约香港亚视 。
1992年6月22日，她与孙兴、吕颂贤、罗烈合作出演的时装剧《烈火雄风》播出，在剧中饰演胡志坚之妹阿娟；11月16日，与邓浩光、翁虹共同主演的古装武侠剧《仙鹤神针》首播，在剧中饰演马君武师妹李青鸾 。
1994年2月2日，她与刘锡明、史蔚霞合作主演的香港动作片《古惑仔之极速风暴》上映，在片中饰演警官阿坤的助手阿南；11月7日，杨玉梅与徐少强、李香琴、潘志文共同出演历史武侠剧《碧血青天珍珠旗》，在剧中饰演洗衣女彩霞 。
1995年3月16日，参演卫翰韬执导的犯罪片《城市炸弹》，与张国强、邵仲衡等人合作；同年，杨玉梅离开亚视，签约无线TVB。1996年6月10日，与郭富城、朱茵、吴毅将、关咏荷共同主演的时装剧《廉政行动组》播出，在剧中饰演花店老板何恩平 。
1997年，与陶大宇、郭可盈合作出演悬疑剧《刑事侦缉档案Ⅲ》，在剧中饰演案件三中美食家王定邦的情人沈若玫。1998年，由吴镇宇、童爱玲、何美钿主演的爱情剧《将军阿福》播出，她在剧中饰演阿花。1999年，杨玉梅与杨丽菁联合主演香港剧情片《致命情网》；同年，参演悬疑片《追踪》 。
2013年11月，杨玉梅与孙兴、姜皓文等联袂主演的动作悬疑《孪生密码》上映，在片中饰演亿万富豪凌志雄的女儿凌丹 。
2015年5月，杨玉梅与金岩控股签订战略合作 ；8月，荣获旧金山环球国际电影节华语电影最佳女演员 。2016年，杨玉梅与王心凌、余少群共同主演爱情喜剧片《我想静静》，在片中饰演吕文经纪人花姐 。
2018年5月5日，杨玉梅担任监制的电影《似水流年》在浙江省遂昌县开机 ；8月6日，出演王伟仁监制的时装动作剧《特技人》在香港翡翠台播出，在剧中饰演关楚耀后母。
2019年1月18日，与吴镇宇、古天乐、袁咏仪出演国民荒诞喜剧片《家和万事惊》上映 ；7月22日，出演TVB古装剧《包青天再起风云》首播，在剧中饰演庞太师夫人刘嫦。2020年2月17日，参演的悬疑犯罪电视剧《法证先锋IV》播出。
2012年4月，杨玉梅出席香港坪洲举行的《国际百万森林计划—香港区植树日2012》社会公益活动，并担任活动嘉宾 。
有“最美亚姐”之称的杨玉梅，在《孪生密码》里有着丰富经验与美貌的杨玉梅在影片中以靓丽的形象出现，一人分饰文武两角，她形象俊美戏路宽广，擅长武打片，在香港拍过数百部电影和电视剧。（腾讯网评） 。
杨玉梅自踏上电影之路以来，给人们带来了无数优秀的作品，积累了丰富的经验。她出色的演艺经历和一直以来谦虚前行的态度得到了世界电影业内人士的高度肯定。（网易娱乐评） 。