祝绪丹6岁开始学舞蹈，初中后考入专业院校继续进修。18岁时，原本与妈妈逛街的她被当街请去拍了一个广告，因此考学校时选择了表演专业 。2011年，她担任《米娜》杂志模特。2012年3月，在线上选秀节目《我为校花狂》第一季中进入前六名 ，并于同年7月签约成为乐视网旗下艺人 。
2014年4月起，与周铁男等合作主演了“咖啡短剧”系列剧情微电影 ，其中《晚安陌生人》、《爱神之夜》获第二届亚洲微电影艺术节“金海棠”奖 ；随后，她还参演了惊悚网络剧《灵魂摆渡2》，饰演少女小鱼 ；12月，参与拍摄都市情感网络剧《心碎急诊室》，饰演李欣瑶；同年12月起，拍摄古装战争电视剧《英雄诀》，饰演章犀犀 ；同年，她还参加了湖南娱乐频道主办的星姐选举并获得亚军 。
2016年1月8日，祝绪丹作为单元剧女主角出演了民国悬疑电视剧《煮妇神探》，并在“月份牌案件”中饰演了善良单纯、极具正义感的月份牌女郎秋水 ；2月21日，与刘恺威、郑爽合作出演的清装宫廷爱情剧《寂寞空庭春欲晚》播出，祝绪丹在剧中饰演俏皮可爱的端敏公主 。2017年1月30日，与杨幂、赵又廷合作主演的古装玄幻剧《三生三世十里桃花》首播，她在剧中饰演了白浅的表亲玄女 ，该剧则以双台平均破一的成绩取得了全国同时段电视剧收视冠军，其全网播放量在播出期间便接近了300亿次，祝绪丹个人也因此得到了更多观众的认可 ；4月12日，她领衔主演的改编自九夜茴青春三部曲之一的《初恋爱》开机拍摄，祝绪丹在剧中饰演美丽、善良、执着的温静 ；4月18日，其主演的青春偶像剧《囧女翻身之嗨如花》在优酷视频播出，她在剧中饰演自带笑点、萌点、爆点的“奇葩推销员”鲁如花 ；随后，祝绪丹还主演了玄幻悬疑网剧《画心师》，并在剧中饰演了外冷内热的画心师岑欢 。
2018年2月，祝绪丹出演的都市时尚剧《谈判官》在湖南卫视黄金档播出，她在剧中饰演职场小白兔商碧晨 ；6月25日，与迪丽热巴、邓伦主演都市爱情剧《一千零一夜》首播，她在剧中饰演了优雅迷人的花艺师周心妍 ；随后，她还搭档阮经天、王天辰等主演年代传奇情感剧《一身孤注掷温柔》，并在剧中饰演顾婉凝 。2019年1月17日，祝绪丹与侯明昊主演的悬疑探案剧《心宅猎人》开机拍摄，她在剧中饰演了有着双重人格、天真而又傲娇的大小姐元慕青 ；2月27日，与曾舜晞、陈钰琪领衔主演的古装武侠剧《倚天屠龙记》在腾讯视频播出，起在剧中饰演美丽灵秀、淡雅脱俗，却因爱生恨的峨眉派第四代掌门人周芷若 。10月10日，加盟国内首档导演选角真人秀《演员请就位》 ；10月12日，参加青春体娱跨界类型节目《超新星全运会第二季》 。
2020年，祝绪丹与王鹤棣主演的改编自文字游戏网络剧《遇龙》开拍 。8月26日，与邢昭林主演的网络剧《程序员那么可爱》开拍，在剧中饰演女程序员陆漓 。
2017年11月，祝绪丹参与北京领养日发起“给TA一个家”流浪动物冬季关爱行动，呼吁更多人将快递箱改造成猫窝，帮助流浪动物温暖过冬 。
2019年4月，祝绪丹参与一本爱心第五季并录制专属音频，号召广大网友参与“听见你的声音”公益朗读，制作有声书籍捐赠给视障儿童及特殊儿童群体 ；5月31日，祝绪丹作为精品集团爱心大使前往贵州丹寨羊角小学，给孩子们带去电子钢琴、文具等六一儿童节礼物，同时呼唤更多人关注山区的孩子们。
祝绪丹长相甜美可人，气质清新灵动，她在每一部作品中都进行着新的尝试，她的表演细腻、收放自如，对不同类型角色出色的把控能力（半岛网、新华网评 ）。